附　录聽A聽　培养基和试剂聽　　(补充件)聽
A1　弯曲杆菌增菌肉汤聽　　
基础液(布氏肉汤)聽　　　
胰蛋白胨:聽10.0g
蛋白胨:聽10.0g聽
葡萄糖:聽1.0g聽　　　　
酵母浸膏:聽2.0g聽　　　　
氯化钠:聽5.0g聽　　　　
亚硫酸氢钠(NaHSO3)聽:聽0.1g聽　　　　
蒸馏水:聽1000mL聽　
　将各成分溶于蒸馏水中。121℃高压灭菌15min。最终pH7.0±0.2,分装于规格适宜的烧瓶。聽　　
FBP浓原液聽　　　
硫酸亚铁(FeSO4):聽2.5g聽　　　
焦亚硫酸钠(Na2S2O5):聽2.5g聽　　　
丙酮酸钠(sodium聽pyruvate):聽2.5g聽　
　将各成分溶于100mL蒸馏水中,经0.20μm滤膜过滤除菌,存于4℃。每100mL经灭菌的基础液中加1mL,混匀。聽　　
1号抗生素溶液聽　　　　
万古霉素：0.75聽g聽　　　　
三甲氧苄氨嘧啶乳酸盐(trimethoprimlactate):聽0.38g聽　　　　
多粘菌素B:聽250聽000聽IU聽
聽聽聽将各成分溶于500mL蒸馏水中,经0.20μm滤膜过滤除菌。每100mL经灭菌的基础液中聽加1mL。聽　　
2号抗生素溶液聽　　　　
利福平(rifampicin)聽:聽0.2g聽　　　　
三甲氧苄氨嘧啶乳酸盐：0.2g聽　　　　
多粘菌素B:聽200聽000聽IU聽　　　　
放线菌酮(actidione)聽:聽2.0g聽　
　将各成分置200mL容量瓶中,加入95%乙醇50mL,振摇使溶解,加入蒸馏水至200mL。过滤除菌,每100mL经高压灭菌的基础液中加1mL。聽
A2　弯曲杆菌分离琼脂(改良Skirrow氏培养基)聽　
　基础液聽　　　　
蛋白胨：15.0g聽　　　　
胰蛋白胨：2.5g聽　　　　
酵母浸膏：5.0g聽　　　　
氯化钠：5.0g聽　　　　
琼脂：15.0g聽　　　　
蒸馏水：1000mL聽
聽聽聽加热并搅拌使琼脂溶化,121℃高压灭菌15min。冷至50～55℃,最终pH7.4±0.2。聽　　FBP浓原液：聽　　
同A1中FBP浓原液,每100mL经灭菌的基础液中加1mL。聽　　
抗生素溶液聽　　　　
万古霉素:聽0.5g聽　　　　
三甲氧苄氨嘧啶乳酸盐：0.25g聽　　　　
多粘菌素B：125000聽IU聽　　　　
蒸馏水：500mL聽　
　将各成分溶于500mL蒸馏水中,经0.20μm滤膜过滤除菌,每100mL经高压灭菌的基础液中加1mL。聽　　
冻溶脱纤维羊(或马)血聽　
　将羊(或马)血反复冻融3次,使血球完全溶解,每100mL基础液中加入5mL。混匀后倒入平皿,每皿20mL。聽
A3　含0.18%琼脂的半固体布氏肉汤聽　
　将1.8g琼脂加于1000mL布氏肉汤(A1中基础液),加热并搅拌使琼脂溶化,分装16mm×125mm试管,每管7mL。121℃高压灭菌15min。最终pH7.0±0.2。聽
A4　布氏琼脂聽　
　将15g琼脂加于1000mL布氏肉汤(A1中基础液),加热并搅动使琼脂溶化,煮沸1min。121℃高压灭菌15min,最终pH7.0±0.2。聽
A5　营养肉汤聽　　　聽
牛肉膏：3.0g聽　　　　
蛋白胨：5.0g聽　　　　
蒸馏水：1000mL聽　
　将各成分加于蒸馏水中,并加热溶解。分装试管时,每管10mL,分装500mL三角烧瓶时,每瓶225mL。121℃高压灭菌15min。最终pH6.8±0.2。聽
A6　中性红溶液聽
　　将中性红2.0g溶于1000mL蒸馏水中,在培养基灭菌前加入,每100mL培养基中加入1mL。A7　氧化酶试剂聽　
N,N,N,N-四甲基对苯二胺盐酸盐(N,N,N,N-tetramethyl-p-phenylenediamine·2HCl):聽1.0g聽　
蒸馏水：100mL聽　
　这是一种应首先选用的试剂。将新鲜配制的试液直接滴于琼脂平板或斜面的培养物上。氧化酶阳性菌落显粉红色,并逐渐变紫。宜用幼嫩培养物进行试验,临用时配制试剂,但如果试剂是避光冷藏,可用7d。也可将培养物置于浸透有试剂的滤纸条上。必须用铂丝挑取培养物,用含铁的金属丝会出现假阳性反应。也可用1%N,N-二甲基对苯二胺盐酸盐(N,N-dimethyl-p-phenylenediamine聽hydrochloride)溶液直接加于平板或斜面培养物上。要保存培养物时,须在3min内将试剂完全倒出,因试剂对细菌有毒性。A8聽亚硝酸盐检测(硝酸盐还原)试剂聽甲液:聽将0.02gN-(1萘)乙二胺盐酸盐[N-(聽I聽naphthyl)聽ethylenediamine·2HCl]聽加于100mL聽1.5mol/L盐酸中,在通风柜中微加热溶解　　
乙液:聽将1.0聽g对氨基苯磺酸加于100mL聽1.5mol/L盐酸中,在通风柜中微加热溶解。聽聽聽
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