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    食品卫生微生物学检验霉菌和酵母计数2—GB



    录入时间:2009-1-13 15:45:26 来源:青岛海博论坛论坛生物

    6操作步骤
    6.1以无菌操作称取检样25g(mL),放入含225mL灭菌水的具玻塞锥形瓶中,振摇30min,即为1:10稀释液。
    6.2用灭菌吸管吸取1:10稀释液10mL,注人灭菌试管中,另用1ml灭菌吸管反复吹吸邹次,使霉菌抱子充分散开。
    6.3取1ml聽1:10稀释液注入含有9ml灭菌水的试管中,另换一支1ml灭菌吸管吹吸五次,此液为1:100稀释液。
    6.4按上述操作顺序做10倍递增稀释液,每稀释一次,换用一支1ml灭菌吸管,根据对样品污染情况的估计,选择三个合适的稀释度,分别在做10倍稀释的同时,吸取1mL稀释液于灭菌平皿中。每个稀释度做两个平皿,然后将晾至45℃左右的培养鉴注人平皿中,并转动平皿使之与样液混匀,待琼脂凝固后,倒置于25℃~28℃温箱中,3d后开始观察,共培养观察5d。
    6.5计算方法:通常选择菌落数在10~150之间的平皿进行计数,同稀释度的两个平皿的菌落平均数乘以稀释倍数,即为每克(或毫升)检样中所含霉菌和酵母数。稀释度选择及菌落报告方式可参考GB/T4789.2.6.6报告:每克(或毫升)食品所含霉菌和酵母数以cfu/g(mL)表示。
    7、霉菌直接镜检计数法霉菌直接镜检计数法见附录A
    附录A(资料性附录)霉菌直接镜检计数法
    常用的为郝氏霉菌计测法,本方法适用于番茄酱罐头。
    A.1设备和材料
    A.1.1折光仪。
    A.1.2显微镜。
    A.1.3郝氏计测玻片:具有标准计测室的特制玻片。
    A.1.4盖玻片。
    A.1.5测微器:具标准刻度的玻片。
    A.2操作步骤
    A.2.1检样的制备:取定量检样,加蒸馏水稀释至折光指数为1.3447—1.3460(即浓度为7.9%—8,8%),备用。
    A.2.2显微镜标准视野的校正:将显微镜按放大率90倍一125倍调节标准视野,使其直径为1.382mm.
    A.2.3涂片:洗净郝氏计测玻片,将制好的你准液,用玻璃棒均匀的摊布于计测室,以备观察。
    A.2.4观测:将制好之载玻片放于显微镜标准视野下进行霉菌观测,一般每一检样观察孙个视野,同一检样应由两人进行观察。
    A.2.5结果与计算:在标准视野下,发现有霉菌菌丝其长度超过标准视野(1.382mm)的六分之一或三根菌丝总长度超过标准视野的六分之一(即测微器的一格)时即为阳隆(+),否则为阴性(一),按100个视野计,其中发现有霉菌菌丝体存在的视野数,即为霉菌的视野百分数。聽聽聽
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