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        聽聽首页 > 微生物知识->微生物检测方法和标准->出口食品中沙门氏菌检验方法

        出口食品中沙门氏菌检验方法



        录入时间:2008-9-28 8:17:40 来源:青岛海博论坛论坛

        聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽中华人民共和国进出口商品检验行业标准
        中华人民共和国进出口商品检验行业标准出口食品中沙门氏菌(辛酯酶荧光)
        聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽检聽验聽方聽法SN聽0332-94
        1聽主题内容与适用范围
        本标准规定了用聽4-甲基伞形酮辛酯试剂快速检验出口食品中沙门氏菌的方法。
        本标准适用于出口肉品、蛋品沙门氏菌的检验,其他食品可参照使用。
        2聽引用标准
        SN聽0170聽出口食品中沙门氏菌(包括亚利桑那菌)检验方法
        3聽符号
        MUCAP:4-methylumbelliferyl-caprylate(4-甲基伞形酮辛酯)的缩写。
        MUCAP:试剂:用聽4-甲基伞形酮辛酯配成的试剂的缩写。
        SS琼脂:沙门氏菌和志贺氏菌琼脂培养基。
        HE琼脂:Hektoen聽Enteric聽琼脂培养基。
        4聽设备与材料
        4.1聽紫外光灯:波长聽366聽nm,功率≥6W。
        4.2聽放大镜:3~4X。
        4.3聽毛细滴管。
        5聽培养基与试剂
        培养基与试剂按聽SN聽0170聽第5章,另补充以下部分:
        5.1聽SS琼脂培养基(含1%蔗糖):见附录聽A1。
        5.2聽HE琼脂培养基:见附录聽A2。
        5.3聽MUCAP试剂:见附录聽A3。
        5.4聽氧化酶试纸:见附录聽A4。
        6聽样品制备及增菌培养
        参照SN聽0170进行。
        7聽分离培养
        7.1聽将增菌培养液摇匀,挑取一接种环,划线接种于聽SS和聽HE琼脂培养基各一个,于聽36
        ±1℃培养聽24±2h。
        7.2聽观察各琼脂平板上有无可疑沙门氏菌菌落。如无可疑菌落,应再继续培养24±2h。
        沙门氏菌的菌落特征见表聽1。
        表聽1聽沙门氏菌属菌落特征
        菌聽落聽特聽征
        SS平板 圆形,边缘整齐;淡黄色,半透明,有或无黑色中心;周围培养基透明淡黄色
        HE平板 圆形,边缘整齐;蓝绿色至蓝色,有或无黑
        色中心;周围培养基透明墨绿色
        8聽测定
        8.1聽从培养的分离培养基上选可疑沙门氏菌菌落(尽量选较大、分离较好的单个菌落),
        用玻璃笔做好标记并编号。
        8.2聽用毛细滴管吸取聽MUCAP试剂,加一滴于编号的菌落上。待一个平板的被检菌落全部
        滴加试剂后,将平板拿至366nm紫外光灯下检视。发蓝色荧光的为聽MUCAP试验阳性,将阳
        性菌落号记录下来。
        8.3聽用接种环挑取荧光反应阳性菌落,涂于氧化酶试纸上,观察涂菌点是否变蓝色。于
        10min内变蓝色为氧化酶试验阳性;不变色为阴性。
        9聽结果的报告
        9.1聽MUCAP试验阴性的样品,报告为“未检出沙门氏菌”
        9.2聽MUCAP试验阳性氧化酶试验阴性的样品,按SN聽0170第四章继续进行生化和血清学试
        验,并根据试验结果报告。
        附聽录聽A聽
        培养基和试剂
        (补充件)
        A1聽SS琼脂培养基(含1%蔗糖)
        牛肉浸膏聽5.0g
        蛋白胨聽5.0g
        乳糖聽10.0g
        蔗糖聽10.0g
        胆盐No.3聽8.5g
        柠檬酸钠聽8.5g
        硫代硫酸钠聽1.0g
        柠檬酸亚铁聽1.0g
        煌绿聽1.0g
        中性红聽0.025g
        琼脂聽13.5g
        蒸馏水聽1聽000ml
        将各成分溶于水,煮沸4~5min。最终pH7.0±0.2。冷至55~66°C,倾注平板。
        A2聽HE琼脂培养基
        (月示)蛋白胨聽12.0g
        酵母浸出物聽3.0g
        乳糖聽12.0g
        蔗糖聽12.0g
        水杨素聽2.0g
        混合胆盐聽9.0g
        氯化钠聽5.0g
        硫代硫酸钠聽5.0g
        柠檬酸铁铵聽1.5g
        溴麝香草酚蓝聽0.065g
        酸性复红聽0.1g
        琼脂聽14.0g
        蒸馏水聽1000mL
        将各成分溶于水,煮沸4~5min。最终pH7.5±0.2。冷至55~60°C,倾注平板。
        A3聽MUCAP试剂
        按生产者提供的使用说明制备工作稀释液,贮于4°C冰箱备用。
        A4聽氧化酶试纸
        氧化酶试液:
        甲液:1%α-萘酚乙醇液;
        乙液:1%二甲基对苯二胺草酸盐水溶液。
        氧化酶试纸:
        将甲液与乙液等量混合。取定性滤纸,浸透混合液后,于70~80°C烘箱烘干。剪成
        适当大小的纸条,密封于塑料袋或瓶中,贮于4°C冰箱备用。
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