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      甘露醇卵黄培养基基础原理和使用方法

      丁鑫鑫
      录入时间:2021-10-20 10:36:43 来源:青岛海博论坛论坛生物

      一、试验原理:

      聽 用于分离培养病原性金黄色葡萄球菌。

      聽 蛋白胨和牛肉粉提供氮源、维生素和生长因子;D—甘露醇为可发酵糖类;7.5%浓度氯化钠可抑制除葡萄球菌外的大部分微生物的生长;琼脂是培养基的凝固剂;酚红为pH指示剂,金黄色葡萄球菌可分解培养基中的甘露醇产酸,使菌落周围变黄,并能降解卵黄中的卵磷脂使菌落产生晕圈。


      二、培养基配方(g/L):

      蛋白胨

      10.0

      D-甘露醇

      10.0

      牛肉粉

      2.5

      氯化钠

      75.0

      酚红

      0.025

      琼脂

      15.0

      pH 7.4±0.2 25℃


      三、试验方法:

      聽 粉体装培养基的使用:

      聽 1. 称取本品112.5g,加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中,煮沸1分钟,121℃高压灭菌15分钟,待培养基冷却至45-50℃时,无菌操作,加入50%卵黄乳液30ml,摇匀,倾入无菌平皿,备用。

      聽 2. 制备质控菌液。

      聽 3. 选择合适稀释度的质控菌液0.1ml,均匀涂布于平板上,每一稀释度接种两个平板。用1μL接种环取非目标菌质控菌液1环,将接种环接触容器边缘3次去除多余液体,在平板表面划六条平行直线,同时接种两个平板。

      聽 4. 36±1℃需氧培养24-48小时,记录实验结果。


      四、结果观察与解释

      聽 接种以下质控菌株,36±1℃需氧培养24-48小时:

      质控菌株

      菌株编号

      接种量(CFU)

      参比或计数培养基

      方法

      质控评定标准

      其他特征

      大肠埃希氏菌

      ATCC25922

      /

      /

      半定量

      G≤1

      /

      伤寒沙门氏菌

      ATCC14028

      /

      /

      G≤1

      /

      金黄色葡萄球菌

      ATCC6538

      20-200

      TSA

      定量

      PR≥0.7

      黄色菌落,菌落周围有晕圈

      金黄色葡萄球菌

      ATCC25923

      20-200

      PR≥0.7

      黄色菌落,菌落周围有晕圈

      表皮葡萄球菌

      CMCC(B)26069

      20-200

      PR≥0.7

      红色菌落,没有晕圈




      图1-1聽甘露醇卵黄培养基微生物质控结果


      五、注意事项:

      聽 本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。


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      注:本文属海博论坛论坛生物原创,未经允许不得转载。

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