一、选择性分离/计数固体培养基的介绍

聽 选择性分离/计数固体培养基常用于特定细菌的分离培养，通常添加有特定的抑制成分，减少非目标菌的生长，对目标菌的生长没有影响或影响较小，达到选择性分离的效果，大部分的选择性培养基中同时添加有特定的底物，使目标菌生长具有特定的菌落特征、颜色反应，更容易识别所需的目标菌。

二、培养基的出厂检验

1.目标菌的生长率测定（定量）

聽 将质控菌株接种至非选择性肉汤或平板中进行活化培养，使用生理盐水或磷酸盐缓冲液进行十倍系列稀释至适宜梯度，吸取0.1mL制备好的菌悬液，分别涂布至待测培养基和参比培养基，每平板接种水平为20-200CFU，至少接种2块平板，将接种好的培养基置于标准规定的条件下进行培养。生长率P_R=N_S（待测平板菌落总数）/NO（参比培养基平板菌落总数，应≥100CFU），目标菌在待测培养基上应有典型的生长和菌落特征，计数培养基的生长率应不小于0.7，分离培养基的生长率一般不小于0.5，最低应在0.1以上。

2.非目标菌的特异性检验（定性）

聽 将质控菌株接种至非选择性肉汤培养基中过夜培养，用1μL接种环挑取菌液在平板上划平行直线或分区划线，置标准规定的温度培养，非目标菌应有典型的菌落外观、大小和形态。

EMB非目标菌特异性检验-鼠伤寒沙门氏菌

3.非目标菌的抑制性检验（半定量）

聽 用1μL接种环取选择性测试工作菌悬液1环， 在待测培养基表面划六条平行直线，同时接种两个平板，按标准规定的条件进行培养，培养后计算生长指数G，每条有比较稠密菌落生长的划线则G为1，如果仅一半的线有稠密菌落生长，则G为0.5。如果划线上没有菌落生长、生长量少于划线的一半或菌落生长微弱，则G为0，记录每个平板的得分总和便得到G。非目标菌的G值一般小于或等于1，至少应达到G＜5。

EMB非目标菌抑制性检验-金黄色葡萄球菌（G≤1）

三、培养基的验收方法

1.目标菌的半定量测试

聽 将质控菌株接种至非选择性肉汤培养基中过夜培养制成工作菌悬液，使用1μL接种环挑取1环菌液，按照标准的方法连续划16线，置于标准规定的温度培养，如果仅一半的线有稠密菌落生长，则G为0.5。如果划线上没有菌落生长、生长量少于划线的一半或菌落生长微弱，则G为0，计算G值总和，应达到G≥6。

EMB目标菌半定量测试-大肠杆菌（G≥6）

2.非目标菌的特异性、选择性测试方法与出厂检验方法完全相同。

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