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    粪便标本的细菌学检查——2



    录入时间:2008-12-2 16:20:10 来源:标本

    三、方法聽
    1、增菌及分纯将疑为沙门菌感染患者或带菌者之粪便标本接种至TT增菌液中进行增菌;疑为痢疾患者或带菌者的粪便标本接种至GN肉汤增菌液中进行增菌,置37℃培养6—8h小时进行增菌。如果根据标本性状,估计标本中致病菌数量较多,则可省去此步,直接作分纯培养,即将标本分别直接划线接种至麦康凯及SS琼脂平板等弱强选择性培养液上,置37℃培养18—24h小时(每一个标本同时接种一个强选择性培养液和一个弱选择性培养液)。聽
    2、生化反应鉴定第2日观察平板上有无可疑菌落,用接种针于上述平板中挑取单个可疑菌落(无色、半透明、光滑、较小)2—3个,分别接种至2—3管双糖培养液内,置37℃培养18—24h。第3日观察细菌生长情况,根据表10—2初步鉴定细菌种类,然后取双糖培养液上聽的菌落进行系列生化鉴定。聽
    聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽表聽聽聽聽聽不同肠道细菌在双糖培养液培养结果(教学实验模拟标本的结果)聽
    聽聽聽聽聽序号聽聽聽聽聽聽上层(乳糖)聽聽聽下层(葡萄糖)聽聽聽聽聽聽动力聽聽聽聽聽聽可能结果聽
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    聽聽聽聽临床标本的检测中,根据实验结果查阅相关资料进行综一合判定。聽
    3、血清学最终鉴定根据双糖培养液及系列生化反应结果判断,最后利用血清学实验对细菌进行最后的确定。聽
    (1)如果初步鉴定结果为沙门菌属,则取双糖培养液斜面上菌苔与沙门菌多价“O”(A-F组)诊断血清作玻片凝集实验,如凝集即为沙门菌属,然后分别与A-F组的单价“O”诊断血清作玻片凝集实验定组,最后以H因子诊断血清作玻片凝集实验以定型(种),必要时可用因子诊断血清定型。聽
    (2)如果根据双糖培养液及系列生化反应结果判断,初步鉴定结果为志贺菌属,则取菌苔与志贺菌属多价诊断血清作玻片凝集实验以定组,必要时可用因子诊断血清定种或型。聽
    【注意事项】聽
    1、若为较典型的沙门菌生化反应,但与A-F组多价“O”诊断血清又不发生凝集反应,应考虑可能为有VI抗原的沙门菌,可将菌制成悬液以100℃加热30分钟以除去VI抗原后,再做血清学鉴定。同理,如为较典型的志贺菌生化反应又不与其多价诊断血清发生凝集,则可用同样方法加热100℃1小时以破坏其K抗原,再做玻片凝集反应鉴定之。聽
    2、由于志贺菌属常易发生耐药性变异,所以,临床上如分离出志贺菌属,均应常规做药物敏感性实验指导临床治疗工作。聽聽聽聽
    聽聽聽

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