聽聽聽伯氏疏螺旋体是引起莱姆病的病原体。病原学诊断的主要方法是分离培养、聚合酶链反应及血清学实验。由于分离培养耗时长，所以一般常用ELJSA技术检测血清中的抗体，结果可疑时，再以免疫印迹技术证实。聽
【材料】聽
1、可疑莱姆病患者血清。聽
2、ELJSA检测抗伯氏螺旋体lgM抗体试剂盒聽
（1）伯氏螺旋体41kd鞭毛蛋白抗原包被96孔酶标板。聽
（2）阳性、弱阳性、阴性对照血清。聽
（3）标本稀释液。聽
（4）酶标抗体（HRP标记羊抗人lgM）。聽
（5）底物：用磷酸盐-枸橼酸缓冲液配置的TMB·H2O2。聽
（6）反应终止液（1mol/l硫酸溶液）。聽
（7）洗涤液。聽
【方法】聽
1、用标本稀释液将患者血清按1：100稀释，即取2ul血清与200ul标本稀释液混合，置37℃20分钟。聽
2、各加100ul阳性、弱阳性、阴性对照及已稀释待检标本上清液于相应孔中，空白对照孔加100ul标本稀释液，盖好反应板，37℃孵育20分钟。聽
3、甩尽板中液体，用200—300ul洗涤液洗5次，每次均需拍干。聽聽
4、每孔加酶标记抗体标抗人lgM抗体100ul，盖好反应板，37℃孵育30分钟。聽
5、甩尽板中液体，洗5次，每次拍干。聽
6、加底物TFMB-H2O2聽100ul，混匀，37℃温育15分钟。聽
7、加终止液1mol/l硫酸50ul，用酶标仪450nm测其OD值。聽
【结果】聽
1、阴性对照平均OD值须<0.20。聽
2、弱阳性对照平均OD值须在0.20—0.25。聽
3、弱阳性对照与阴性对照的平均OD值之比须大于或等于2。聽
聽聽聽聽符合以上3个条件，本次实验结果可信，否则重复实验。聽
4、若待检标本孔显色比弱阳性对照孔深，则判为阳性，即以P/N>2.1为阳性。聽756聽聽聽
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