• 海博论坛


  • 海博论坛

    中文版聽聽|聽聽 English聽聽|聽聽 加入收藏聽聽|聽聽 客服热线:400-0532-596
    海博论坛论坛微信公众号
    海博论坛论坛天猫旗舰店
    微生物技术资料
    文章检索

    酵母总RNA提取方法



    录入时间:2010-11-1 9:05:21 来源:生命经纬知识库

    热酚法抽提酵母RNA

    (1)聽聽将酵母细胞培养在3ml选择性培养基中,30过夜旋转培养。

    (2)聽聽稀释过夜培养的菌液,重新在10ml培养基中培养细胞。

    (3)聽聽OD600达到1.0时,收菌,4000rpm/min离心5min,弃培养基。

    (4)聽聽将细胞悬浮于400μl AE缓冲液(50mM Sodium Acetate,10mM EDTA 调整pH值至5.2)。

    (5)聽聽加入1/10体积的10% SDS,充分混合。

    (6)聽 加入等体积在65预热的酸性酚(pH4.5),混合。

    (7)聽聽65加热5min,冰上放置10min

    (8) 聽在室温下8000rpm/min离心10min

    (9)聽聽取水相,加入等体积的酚/氯仿/异戊醇(25241),10000rpm/min离心8min

    (10)聽 取水相,加入等体积氯仿/异戊醇(49110000rpm/min离心8min

    (11)聽 加入1/10体积3M pH5.2的醋酸钠,2.5倍体积的纯乙醇,-20过夜沉淀。

    (12)聽 沉淀样品于4离心5min,去除液体。

    (13)聽 在冰上干燥RNA(放置15min),最后用适量DEPC水溶解RNA

    上一篇:培养基制备技术

    下一篇:MS培养基配制中的五点注意

    首页 | 关于我们 | 网上商城 | 在线客服 | 联系我们
    业务联系电话
    聽聽 400-0532-596 0532-66087773
    聽聽 0532-66087762 0532-81935169
    邮箱:qdhbywg@vip.126.com
    地址:青岛市城阳区锦汇路1号A2栋
    产品技术咨询
    聽聽工作日(周一至周六8:00-18:00):
    聽聽18562658263聽13176865511
    聽聽其它时段:13105190021
    投诉与建议:13105190021 13006536294
    (注:以上手机号均与微信同号)