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培养基的配制原则



录入时间:2012-7-27 8:56:25 来源:原创

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(一)培养基组分应适合微生物的营养特点
即根据不同微生物的营养需要配制不同的培养基。聽
聽聽聽聽聽聽聽聽聽不同营养类型的微生物,其对营养物的需求差异很大。如自养型微生物的培养基完全可以(或应该)由简单的无机物质组成。异养做生物的培养基至少需要含有一种有机物质,但有机物的种类需适应所培养菌的特点。聽
聽聽聽聽聽聽聽按微生物的主要类群来说,它们所需要的培养基成分也不同:聽
聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽细菌:聽聽聽聽聽聽牛肉膏蛋白胨培养基聽
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聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽酵母菌;聽聽聽麦芽汁聽
当对试验菌营养需求特点不清楚的时候,可以采用‘生长谱’法进行测定。聽
(二)营养物的浓度与比例应恰当
●浓度过高——微生物的生长起抑制作用,聽
聽聽浓度过小——不能满足微生物生长的需要。聽
●碳氮比(C/N)直接影响微生物生长与繁殖及代谢物的形成与积累,故常作为考察培养基组成时的一个重要指标;聽
C/N比值=聽碳源中的碳原子的mol数/氮源中所含的氮原子的mol数聽
例:谷氨酸生产中聽
聽C/N聽=4/1时,菌体大量繁殖,谷氨酸积累少;聽
C/N=3/1聽时,菌体生长受抑制,而谷氨酸大量增加。聽
●速效性氮(或碳)源与迟效性氮(或碳)源的比例聽
聽●各种金属离子间的比例聽
(三)物理化学条件适宜
(1)pH:聽聽聽聽聽聽各类微生物的最适生长pH值各不相同:聽
聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽细聽聽聽聽菌:7.0~8.0聽聽聽聽放线菌:7.5~8.5聽
聽聽聽聽聽聽聽聽酵母菌:3.8~6.0聽聽聽聽霉聽聽聽聽菌:4.0~5.8聽
聽聽聽聽聽聽聽聽在微生物的生长和代谢过程中,由于营养物质的利用和代谢产物的形成与积累,培养基的初始pH值会发生改变,为了维持培养基pH值的相对恒定,通常采用下列两种方式:聽
内源调节:在培养基里加一些缓冲剂或不溶性的碳酸盐;调节培养基的碳氮比。聽
外源调节:按实际需要不断向发酵液流加酸或碱液聽
☆磷酸缓冲液:pH值从6.0~7.6之间聽
☆加入CaCO3:聽
☆培养基中所含氨基酸、肽、蛋白质等物质也可起到缓冲作用。聽
(2)渗透压和aw
渗透压聽聽聽聽聽
聽聽聽聽聽聽聽聽等渗溶液聽聽聽聽适宜微生物生长聽
聽聽聽聽聽聽聽聽高渗溶液聽聽聽聽细胞发生质壁分离聽
聽聽聽聽聽聽聽聽低渗溶液聽聽聽聽细胞吸水膨胀,直至破裂聽
大多数微生物适合在等渗的环境下生长,而有的菌如Staphylococcus聽aureus则能在3mol/L聽聽NaCl的高渗溶液中生长。能在高盐环境(2.8~6.2/L聽聽NaCl)生长的微生物常被称为嗜盐微生物(Halophiles)。聽
(3)氧化还原电势(redox聽poyential)
各种微生物对培养基的氧化还原电势的要求:聽
好氧微生物:+0.3~+0.4V,(在>0.1V以上的环境中均能生长).厌氧微生物:只能在+0.1V以下生长聽
兼性厌氧微生物:+0.1V以上呼吸、+0.1V以下发酵聽

培养基是多氧化还原偶的复杂电化学系统,测出的Eh值仅代表其综合结果。聽
对微生物影响最大的是:分子氧和分子氢的浓度聽
培养基中常用的还原剂:巯基乙酸、抗坏血酸、硫化氢、半胱氨酸、谷胱甘肽、二硫苏糖醇等。聽

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