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    SPS琼脂原理和使用方法

    张辉
    录入时间:2018-5-4 8:13:37 来源:青岛海博论坛论坛生物

    一、试验原理:

    培养基用于产气荚膜梭菌的平板计数(GB标准)。培养中的胰酪蛋白胨和酵母浸粉提供碳氮源、维生素和生长因子;亚硫酸钠和柠檬酸铁用于检测硫化氢的产生,产气荚膜梭菌可还原亚硫酸盐为硫化物,硫化物与铁反应生成黑色硫化铁,使菌落中心呈黑色;琼脂是培养基的凝固剂;多粘菌素B和磺胺嘧啶钠抑制非梭菌的细菌。

    二、培养基配方g/L:

    胰酪蛋白胨

    酵母浸粉

    柠檬酸铁

    亚硫酸钠

    琼脂

    pH7.0±0.125

    15.0

    10.0

    0.5

    0.5

    15.0

    三、试验方法:

    1)加热溶解以上各组分,待冷却后调节pH7.0±0.125),分装三角瓶,121℃高压灭菌15分钟,却至50℃时,每100ml培养基加入1支多粘菌素B硫酸盐溶液(1.2mg)1支磺胺嘧啶钠溶液(12mg),混匀,倾入无菌平皿,备用。

    2)采用滤膜法,取50mL的水样用孔径为0.45μm的滤膜过滤,然后将滤膜移至SPS琼脂培养基上,倒置于36℃±1℃厌氧培养24h,计数黑色菌落。

    四、试验结果判断:

    产气荚膜梭菌在滤膜上的单菌落呈黑色,任意挑取3个至5个在滤膜上生长的黑色菌落,分别接种FT培养基,于36±1厌氧培养18h-24h后,将培养物做确证试验,根据试验结果确证产气荚膜梭菌的存在。


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    注:本文属海博论坛论坛生物原创,未经允许不得转载。

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